世界上最著名的肖像画是意大利著名画家达·芬奇。他所画的《蒙娜丽莎》，这幅肖像画花了达·芬奇4年的时间。

多个世纪来，人们一直在谈论肖像画上的主人公神秘的微笑:它似乎在变化。不同的观者或在不同的时间去观看，感受似乎都不相同。有时觉得她笑得舒畅温柔，有时又显得严肃;有时像是略含哀伤，有时甚至显出讥嘲和揶揄。

在同一幅画中，光线的变化不能像在雕塑中产生那样大的差别。但在蒙娜丽莎的脸上，微暗的阴影时隐时现，为她的双眼与唇部披上了一层面纱。而人的笑容主要表现在眼角和嘴角上，但达·芬奇却偏把这些部位画得若隐若现，没有明确的界线，因此才会有这令人捉摸不定的“神秘的微笑”。这幅肖像画成为世界上最著名、最使人难以忘怀的一幅肖像画。